Estudio de una Ser/Thr kinasa de Listeria monocytogenes
Abstract
Listeria monocytogenes es un patógeno alimenticio de gran importancia médica y económica. Es una bacteria Gram positiva y dentro de este tipo de microorganismos, las Ser/thr kinasas son pobremente entendidas, pese a que se les atribuyen roles regulatorios de gran importancia. En este trabajo se comenzó
la caracterización de una de ellas, Lmo1820, una kinasa transmembrana de Listeria monocytogenes similar a las encontradas en Mycobacterium tuberculosis y Bacillus subtilis.
Resultados previos han demostrado que una cantidad importante de STPKs bacterianas contienen segmentos transmembrana, a diferencia de sus pares eucariotas. Esto sugiere que podrían actuar como moléculas receptoras involucradas directamente en la interacción con ligandos extracelulares. Más aún, la existencia de este tipo de kinasas con dominios extracelulares PASTA, tales como Lmo1820, implica su rol en rutas de señalización conservadas entre diversas especies de bacterias Gram positivas.
Como primer paso para un mayor entendimiento de esta kinasa, se iniciaron las construcciones necesarias
para obtener una cepa mutante por deleción del gen lmo1820; así se podría estudiar in vivo el rol fisiológico de la STPK. Además, se construyó un vector para expresar la subunidad catálitica de Lmo1820 y se ajustaron las condiciones para la purificación de dicho dominio en Escherichia coli. Esto permitirá llevar a cabo ensayos in vitro que provean mayor información sobre su mecanismo de acción y sustrato fisiológico.